腫瘤細(xì)胞系異種移植模型

1.實(shí)驗(yàn)原理：

       R-NSG小鼠極度的免疫缺陷使其無(wú)法識(shí)別和排斥外來(lái)的人源腫瘤細(xì)胞，為腫瘤細(xì)胞的定植和生長(zhǎng)提供了近乎“無(wú)障礙”的環(huán)境。

2.實(shí)驗(yàn)方法

將體外培養(yǎng)的人源腫瘤細(xì)胞系（如A549肺癌細(xì)胞、MCF-7乳腺癌細(xì)胞等）通過(guò)皮下、尾靜脈或原位注射的方式植入NSG小鼠。

3.實(shí)驗(yàn)流程：

  ①腫瘤細(xì)胞準(zhǔn)備：體外培養(yǎng)并收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的腫瘤細(xì)胞，重懸于PBS或基質(zhì)膠中；

  ②NSG小鼠準(zhǔn)備：選擇6-8周齡NSG小鼠，必須在SPF級(jí)屏障設(shè)施中飼養(yǎng)，提供無(wú)菌免疫缺陷飼料和無(wú)菌水。

  ③腫瘤細(xì)胞接種：

  a.皮下注射：小鼠背部側(cè)方或肩胛骨區(qū)域的皮下，此方法最常用，易于監(jiān)測(cè)腫瘤體積。

  b.原位注射：將細(xì)胞注射到腫瘤原發(fā)器官（如肝臟、乳腺脂肪墊），能更好地模擬腫瘤微環(huán)境。

  c.尾靜脈注射：用于建立腫瘤轉(zhuǎn)移模型。需通過(guò)活體成像（如生物發(fā)光）或終點(diǎn)組織學(xué)分析來(lái)評(píng)估轉(zhuǎn)移灶。

 ④腫瘤監(jiān)測(cè)：

  a.腫瘤監(jiān)測(cè)：從接種后約一周開(kāi)始，每周2-3次用游標(biāo)卡尺測(cè)量皮下腫瘤的長(zhǎng)徑；

  b.小鼠健康監(jiān)測(cè)：每日觀察小鼠的精神狀態(tài)、活動(dòng)性、毛發(fā)和體重。體重下降超過(guò)20%是重要的痛苦指標(biāo)；

  c.藥物干預(yù)：當(dāng)腫瘤體積達(dá)到預(yù)設(shè)值（如100 mm3）時(shí)，開(kāi)始分組給藥（對(duì)照、治療組），并持續(xù)監(jiān)測(cè)腫瘤生長(zhǎng)曲線。

 ⑤終點(diǎn)分析與樣本收集